Διαφορά κλειδιού - Κυτταρομετρία ροής vs FACS

Στο πλαίσιο της κυτταρικής θεωρίας, τα κύτταρα είναι η βασική δομική και λειτουργική μονάδα όλων των ζωντανών οργανισμών. Η διαλογή κυττάρων είναι μια μεθοδολογία που χρησιμοποιείται για τον διαχωρισμό διαφορετικών κυττάρων σύμφωνα με τα φυσιολογικά και μορφολογικά χαρακτηριστικά. Μπορούν να έχουν ενδοκυτταρικά ή εξωκυτταρικά χαρακτηριστικά. Η αλληλεπίδραση του DNA, του RNA και των πρωτεϊνών θεωρείται ενδοκυτταρική διαδραστική ιδιότητα, ενώ το σχήμα, το μέγεθος και οι διάφορες επιφανειακές πρωτεΐνες θεωρούνται ως εξωκυτταρικές ιδιότητες. Στη σύγχρονη επιστήμη, οι μεθοδολογίες διαλογής των κυττάρων έχουν οδηγήσει στην υποβοήθηση της διαφορετικής διερεύνησης σε βιολογικές μελέτες και επίσης στην καθιέρωση νέων αρχών μέσω της έρευνας για την ιατρική. Η διαλογή κυττάρων διεξάγεται σε διάφορες μεθοδολογίες που περιλαμβάνουν τόσο πρωτογενή με μικρότερο εξοπλισμό όσο και προηγμένες τεχνολογικές μεθοδολογίες με τη χρήση εξελιγμένων μηχανημάτων. Η κυτταρομετρία ροής, η ταξινόμηση με ενεργοποιημένα φθορίζοντα κύτταρα (FACS), η επιλογή μαγνητικών κυττάρων και η διαλογή μεμονωμένων κυττάρων είναι οι κυριότερες μεθοδολογίες που χρησιμοποιούνται. Η κυτταρομετρία ροής και τα FACS αναπτύσσονται για να διαφοροποιούν τα κύτταρα σύμφωνα με τις οπτικές τους ιδιότητες. Το FACS είναι ένας εξειδικευμένος τύπος κυτταρομετρίας ροής. Η κυτταρομετρία ροής είναι μια μεθοδολογία που χρησιμοποιείται κατά την ανάλυση ενός ετερογενούς πληθυσμού κυττάρων σύμφωνα με διαφορετικά μόρια κυτταρικής επιφάνειας, μέγεθος και όγκο που επιτρέπει τη διερεύνηση μεμονωμένων κυττάρων. Το FACS είναι μια διαδικασία με την οποία ένα δείγμα μείγματος κυττάρων ταξινομείται σύμφωνα με τα χαρακτηριστικά σκέδασης φωτός και φθορισμού σε δύο ή περισσότερα δοχεία. Αυτή είναι η βασική διαφορά μεταξύ κυτταρομετρίας ροής και FACS.

ΠΕΡΙΕΧΟΜΕΝΑ

1. Επισκόπηση και διαφορά κλειδιών 2. Τι είναι η κυτταρομετρία ροής 3. Τι είναι το FACS 4. Ομοιότητες μεταξύ κυτταρομετρίας ροής και FACS 5. Σύγκριση μεταξύ των πλευρών - Κυτταρομετρία ροής έναντι FACS σε πίνακα 6. Σύνοψη

Τι είναι η κυτταρομετρία ροής;

Η κυτταρομετρία ροής είναι μια μέθοδος η οποία χρησιμοποιείται για την εξέταση και τον προσδιορισμό της έκφρασης των ενδοκυτταρικών μορίων και της κυτταρικής επιφάνειας και για τον ορισμό και το χαρακτηρισμό διακριτών κυτταρικών τύπων. Χρησιμοποιείται επίσης στον προσδιορισμό του κυτταρικού όγκου και του μεγέθους των κυττάρων και στην αξιολόγηση της καθαρότητας των υποπληθυσμών που απομονώνονται. Αυτό επιτρέπει την αξιολόγηση πολλαπλών παραμέτρων των μεμονωμένων κυττάρων κατά τον ίδιο περίπου χρόνο. Χρησιμοποιείται κυτταρομετρία ροής για τη μέτρηση της έντασης φθορισμού που παράγεται λόγω αντισωμάτων με φθορίζοντα σήματα που βοηθούν στην ταυτοποίηση πρωτεϊνών ή προσδεμάτων που δεσμεύονται σε συνδεδεμένα κύτταρα.

Γενικά, η κυτταρομετρία ροής περιλαμβάνει κυρίως τρία υποσυστήματα. Είναι η ρευστοποιητική, η ηλεκτρονική και η οπτική. Στην κυτταρομετρία ροής είναι διαθέσιμα πέντε βασικά συστατικά τα οποία χρησιμοποιούνται στη διαλογή των κυττάρων. Είναι ένα κύτταρο ροής (ένα ρεύμα υγρού που χρησιμοποιείται για τη μεταφορά τους και ευθυγραμμίζει τα κύτταρα για τη διαδικασία οπτικής ανίχνευσης), ένα σύστημα μέτρησης (μπορεί να είναι από διαφορετικά συστήματα, συμπεριλαμβανομένων των λαμπτήρων υδραργύρου και ξένων, χαμηλής ισχύος αερόψυκτα λέιζερ ή λέιζερ διόδου), ένα ADC. Σύστημα αναλογικού προς ψηφιακό μετατροπέα, σύστημα ενίσχυσης και υπολογιστή για ανάλυση. Η απόκτηση είναι η διαδικασία με την οποία συλλέγονται τα δεδομένα από τα δείγματα χρησιμοποιώντας κυτταρόμετρο ροής. Αυτή η διαδικασία διαμεσολαβείται από έναν υπολογιστή ο οποίος συνδέεται με τον κυτταρόμετρο ροής. Το λογισμικό που υπάρχει στον υπολογιστή αναλύει τις πληροφορίες που τροφοδοτούνται στον υπολογιστή από τον κυτταρόμετρο ροής. Το λογισμικό έχει επίσης την ικανότητα να προσαρμόζει τις παραμέτρους του πειράματος που ελέγχει τον κυτταρόμετρο ροής.

Τι είναι το FACS;

Στο πλαίσιο της κυτταρομετρίας ροής, η διαλογή κυττάρων που ενεργοποιείται με φθορισμό (FACS) είναι μια μέθοδος που χρησιμοποιείται για τη διαφοροποίηση και τη διαλογή ενός δείγματος μίγματος βιολογικών κυττάρων. Τα κύτταρα διαχωρίζονται από δύο ή περισσότερα δοχεία. Η μέθοδος ταξινόμησης βασίζεται στα φυσικά χαρακτηριστικά του κυττάρου τα οποία περιλαμβάνουν χαρακτηριστικά σκέδασης φωτός και φθορισμού του κυττάρου. Αυτή είναι μια σημαντική επιστημονική τεχνική, η οποία μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την απόκτηση αξιόπιστων ποσοτικών και ποιοτικών αποτελεσμάτων σημάτων φθορισμού που εκπέμπονται από κάθε κύτταρο. Κατά τη διάρκεια του FACS, αρχικά, το προ-λαμβανόμενο μίγμα κυττάρων. ένα εναιώρημα κατευθύνεται προς το κέντρο ενός στενού ρεύματος υγρού το οποίο ρέει γρήγορα. Η ροή του υγρού σχεδιάζεται προκειμένου να διαχωριστούν τα κύτταρα στο εναιώρημα με βάση τη διάμετρο κάθε κυττάρου. Ένας μηχανισμός δόνησης εφαρμόζεται στο ρεύμα του εναιωρήματος το οποίο έχει ως αποτέλεσμα το σχηματισμό μεμονωμένων σταγονιδίων.

Το σύστημα βαθμονομείται για να δημιουργήσει ένα μόνο σταγονίδιο με ένα κελί. Λίγο πριν από το σχηματισμό σταγονιδίων, η ανάρτηση ροής κινείται κατά μήκος μίας συσκευής μέτρησης φθορισμού η οποία ανιχνεύει το χαρακτηριστικό φθορισμού κάθε κυττάρου. Στο σημείο σχηματισμού σταγονιδίων, τοποθετείται ένας ηλεκτρικός δακτύλιος φόρτισης ο οποίος προκαλεί ένα φορτίο στον δακτύλιο πριν από τη μέτρηση της έντασης του φθορισμού. Μόλις σχηματιστούν τα σταγονίδια από το ρεύμα εναιωρήματος, ένα φορτίο παγιδεύεται εντός των σταγονιδίων που στη συνέχεια εισέρχεται σε ένα σύστημα ηλεκτροστατικής εκτροπής. Σύμφωνα με τη φόρτιση, το σύστημα εκτρέπει τα σταγονίδια σε διαφορετικά δοχεία. Η μέθοδος εφαρμογής του φορτίου ποικίλλει ανάλογα με τα διαφορετικά συστήματα που χρησιμοποιούνται στο FACS. Ο εξοπλισμός που χρησιμοποιείται στο FACS είναι γνωστός ως διαλογέας κυττάρων με ενεργοποιημένο φθορισμό.

Ποια είναι η ομοιότητα μεταξύ κυτταρομετρίας ροής και FACS;


  • Η κυτταρομετρία ροής και τα FACS αναπτύσσονται για να διαφοροποιούν τα κύτταρα σύμφωνα με τις οπτικές τους ιδιότητες.

Ποια είναι η διαφορά μεταξύ κυτταρομετρίας ροής και FACS;

Περίληψη - Κυτταρομετρία ροής vs FACS

Το κύτταρο είναι η βασική δομική και λειτουργική μονάδα όλων των ζωντανών οργανισμών. Η διαλογή κυττάρων είναι η διαδικασία με την οποία τα κύτταρα απομονώνονται και διαφοροποιούνται σε διαφορετικές κατηγορίες βάσει των ενδοκυτταρικών και εξωκυτταρικών ιδιοτήτων τους. Η κυτταρομετρία ροής και οι FACS είναι δύο σημαντικές μεθοδολογίες στη διαλογή των κυττάρων. Και οι δύο διαδικασίες αναπτύσσονται για να διαφοροποιούν τα κύτταρα ανάλογα με τις οπτικές τους ιδιότητες. Η κυτταρομετρία ροής είναι μια μεθοδολογία που χρησιμοποιείται κατά την ανάλυση ενός ετερογενούς πληθυσμού κυττάρων σύμφωνα με διαφορετικά μόρια κυτταρικής επιφάνειας, μέγεθος και όγκο που επιτρέπει τη διερεύνηση μεμονωμένων κυττάρων. Το FACS είναι μια διαδικασία με την οποία ένα δείγμα μείγματος κυττάρων ταξινομείται σύμφωνα με τα χαρακτηριστικά σκέδασης φωτός και φθορισμού σε δύο ή περισσότερα δοχεία. Αυτή είναι η διαφορά μεταξύ κυτταρομετρίας ροής και FACS.

Κατεβάστε την έκδοση PDF της κυτταρομετρίας ροής vs FACS

Μπορείτε να κατεβάσετε την έκδοση PDF αυτού του άρθρου και να το χρησιμοποιήσετε για σκοπούς εκτός σύνδεσης σύμφωνα με τη σημείωση παραπομπής. Παρακαλώ κατεβάστε εδώ την έκδοση PDF εδώ Διαφορά μεταξύ κυτταρομετρίας ροής και FACS

Αναφορά:

  1. Κυτταρομετρία ροής (FCM) / FACS | Κατηγοριοποίηση κυττάρων με ενεργοποίηση φθορισμού (FACS). Πρόσβαση στις 22 Σεπτεμβρίου 2017. Διατίθεται εδώ Ibrahim, Sherrif F., και Ger van den Engh. "Κυτταρομετρία ροής και ταξινόμηση κυττάρων." SpringerLink, Springer, Βερολίνο, Χαϊδελβέργη, 1 Ιανουαρίου 1970.. Πρόσβαση στις 22 Σεπτεμβρίου 2017. Διατίθεται εδώ

Ευγένεια εικόνας:


  1. 'Cytometer'By Kierano - Η δική του δουλειά (CC BY 3.0) μέσω Commons Wikimedia' Φθορισμού υποβοηθούμενη διαλογή κυττάρων (FACS) B'By SariSabban - Sabban, Sari (2011) Ανάπτυξη ενός in vitro μοντέλου συστήματος για τη μελέτη της αλληλεπίδρασης του Equus caballus IgE με τον υποδοχέα FcεRI υψηλής χημικής συγγένειας (διδακτορική διατριβή), το Πανεπιστήμιο του Sheffield (CC BY-SA 3.0) μέσω Wikimedia Commons